LC 크로마토그래피 원리 (컬럼분리)

오늘은 LC 크로마토그래피의 원리를 공부해서 정리해보려고 해요
공부하는 입장에서 정리한 아주 기초적인 내용이니 전문가 분들은 뒤로 가기를...
 
크로마토그래피의 목적은 여러 가지가 섞여있는 혼합물을 분리하는 거예요

혼합물이 컬럼을 통과하면서 분리되는 예

위와 같은 방식으로 컬럼의 분리되어서 시간에 따른 피크가 나타나게 돼요
이때 중요한 것은 컬럼 내의 고정상과 이동상을 잘 사용해서 혼합물을 분리해 내는 것이에요
 

 이동상

1. 혼합물을 운반하여 컬럼 내 고정상을 통과시키는 역할
2. 역상 HPLC의 경우 물, MeOH(메탄올), ACN(아세토나이트릴), THF(테트라하이드로퓨란) 위주로 많이 사용

고정상

1. 컬럼내부에 채워져 있는 입자
2. 역상 HPLC에서는 C18, C8, Amino, phenyl 등을 많이 씀

 

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그럼 분리가 어떻게 일어나느냐?

예전에 교육받을 때 'Like dissolve like' 이런 얘기가 있었어요
무슨 뜻이냐 하면 비슷한 애들끼리 어울린다는 뜻이에요
컬럼의 고정상이 비극성이면 비극성 물질과의 상호작용이 커서 머무름이 커지고 극성 물질이 상대적으로 상호작용이 적어서 머무름이 적다고 볼 수 있는 거죠

혼합물이 고정상이랑 상호작용을 할 때 이동상도 계속 흐르기 때문에 이동상과 고정상을 왔다 갔다하며 다른 속도로 분리가 되는 원리예요
 
그렇기 때문에
컬럼과의 결합력이 강할수록 머무름이 길어지고 피크가 늦게 나옴
반대로 컬럼과의 결합력이 약할수록 머무름이 짧아져서 피크가 빠르게 나온다고 볼 수 있어요

 

오늘은 여기까지 쓰고 다음에 2탄을 써볼게요~~

2탄
https://9989930.tistory.com/m/16

LC 크로마토그래피 원리 2